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人生長激素的放射免疫分析法
發布時間： 2021-12-16 點擊次數： 989次材料與儀器
hGH表達質粒
洗滌液 親和素包被珠
試管 γ計數儀步驟
1. 取轉染了hGH表達質粒的哺乳動物細胞的培養液100~500 μl。
2. 加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-標記的抗體溶液，混合。加入1顆親和素包被珠，蓋上試管蓋或用Parafilm膜封口，室溫下在一水平旋轉器上以約170 r/min 搖動下溫育90 min。
3. 加2 ml 冼滌液洗磁珠兩次。*吸干洗滌液。
圖一、人生長激素表達載體
4. 將試管置于γ計數儀上計數1 min。5. 用試劑盒中的hGH標準品測得的數據繪制標準曲線。用這個標準曲線來計算未知樣品的hGH含量。同實驗其他方法
CAT活性的層析分析法
1. 100 mm 培養皿中的轉染了CAT表達質粒的貼壁細胞，用PBS洗兩次，每次5 ml每培養皿加入1 ml TEN溶液。將細胞置于冰浴5 min。 2. 用橡膠
原位裂解細胞的CAT分析法
1. 60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質粒的細胞，用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液，在室溫下溫育2~5 min。 2. 吸去低滲緩沖液，加入400 μl T
CAT活性的相-抽提分析法
一、來源于哺乳動物細胞 1. 按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法，制備哺乳動物細胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細胞方法來收集細胞，則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2
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