無血清培養基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養基加少量血清所配制的*培養基可以滿足大部分細胞培養的要求,但對有些實驗卻不適合,如觀察一種生長因子對某種細胞的作用,這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子;又如需要測定某種細胞在培養過程中分泌某種物質(抗體、生長因子)的能力;或者要大規模的培養某種細胞,以獲得它們的分泌產物。因此研制出無血清培養基一直是生物科學工作者努力的目標。
科研實驗使用轉染細胞在轉染前要換上無血清培養基。本來條件好好的,轉染效率也可以接受。但是過了一段時間就發生了細胞在有血清的培養基中長的好好的,一換無血清的培養基就死亡的現象。大概4個小時就能看到較多的細胞飄起來。換了不同批次的培養基,但仍不行,這是怎么回事呢?
解析:
1.兩周后的培養液應補加谷氨酰胺,或者重新配液,轉染時應不含抗生素。
2.確認操作方法和環境,建議檢查一下。
3.脂質體的毒性很大,如果有質粒參與對細胞損傷更大,如果在常溫放置過,對細胞更大,假期冰箱是否斷過電。
4.培養箱的溫度、CO2濃度,濕度等。