一、細胞轉染簡介:
隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。
轉染 ,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。
理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介導的轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優勢。但是,病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學介導的轉染方法,則各有其特點。
需要指出的一點,無論采用哪種轉染技術,要獲得較優的轉染結果,可能都需要對轉染條件進行優化。影響轉染效率的因素很多,從細胞類型、細胞培養條件和細胞生長狀態,到轉染方法的操作細節,都需要考慮。
二、Zeta Life 轉染試劑介紹:
Zeta Life轉染試劑是世界首*入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉染試劑,對細胞無毒性,不易出現細胞死亡,不激活細胞免疫機制。Zeta Life高效率轉染BV-2小鼠膠質瘤細胞轉染試劑采用的是新型小分子多肽材料,其特點是非脂質體材料,大小是80nm左右,由于形狀是圓形的,不會對細胞有物理性損傷,材料表面有特異性結合接頭,只特異性識別DNA、RNA,對血清成分(如細胞因子、蛋白、內毒素等)不識別也不結合;特異性接頭與核酸形成轉染復合物,轉染復合物通過細胞主動吞噬進入細胞,進入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料,對細胞無內毒素影響,不易出現細胞死亡。轉染效率高,適用細胞種類多,可轉染質粒DNA、siRNA和小動物活體轉染。
Zeta Life高效率轉染BV-2小鼠膠質瘤細胞轉染試劑
成功轉染BV-2小鼠膠質瘤細胞
三、轉染條件
細胞密度:60%左右
質粒DNA濃度:700ng/ul
質粒DNA大小:6500bp
培養板:24孔板
轉染試劑用量:3ul
質粒DNA用量:電訊
轉染試劑:AD600075,Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑
轉染時間:48小時
培養基:Z7010FBS-500澳洲胎牛血清
細胞凍存:CE70100T無血清細胞凍存液
細胞活力檢測:K009-500,cck8
四、Zeta Life轉染試劑系列規格價格:
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600025 0.25ml/詢價
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600050 0.5ml/詢價
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600075 0.75ml/詢價
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600150 1.5ml/詢價
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD600500 5ml/詢價
品牌:美國Zeta Life 貨號:AD601000 10ml/詢價
五、成功轉染細胞案例分享:
Zeta Life介紹:
美國 Zeta Life 公司成立于 1989 年,是國際無血清細胞培養基 DMEM/F12 主要完成人,有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養基、以及干細胞、免疫細胞及腫瘤細胞等多種不同類型哺乳動物細胞的無血清培養液生產經驗;也是目前世界胎牛血清、無血清培養基最大的 OEM 供應商之一;每批血清均有完整的血源證明文件、獸醫師檢驗證明及品質測試報告;ZETA LIFE 血清在 100 級的無菌間采用全自動方式制造生產,具有良好的可再現性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區聯合開發用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的全球蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發及生產的主要關鍵技術之一。深圳市安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國深圳地區總代理。