一、小鼠睪丸間充質細胞轉染試劑簡介:
隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。
理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。而Zeta Life多肽小分子轉染試劑采用新型分子材料,其尺寸大小是傳統脂質體轉染試劑體積的1/10;通過細胞主動吞噬吸收進入細胞;進入后對細胞膜無物理性損傷,不易出現細胞變形,保持高的細胞活力;不激活細胞表面或細胞體內marker;可反映真實的細胞通路蛋白原始數據;可轉染免疫細胞、懸浮細胞等。
二、使用說明:
1、材料準備
RNA 濃度 20 uM /L
質粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水;②無內毒素 )
2、操作步驟
提前 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉染。
核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細胞培養基中加入核酸復合物:根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養基 里面可以含有血清。
細胞換液:轉染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液。
分析結果:質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩定表達細胞株的篩選,則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。
三、產品說明:
1、產品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規格
貨號:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150
規格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml
3、儲存條件
常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。
四、小鼠睪丸間充質細胞轉染試劑轉染效果