THP-1細胞高效轉染試劑
一、轉染條件
轉染細胞密度:電訊
培養板:24孔板
轉染試劑用量:電訊
質粒DNA用量:電訊
轉染試劑:AD600150,Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑
轉染時間:48小時
血清:Z7180FBS-500超低內毒素胎牛血清
細胞凍存:CE70100T無血清細胞凍存液
細胞活檢測:K009-500,CCK8
二、THP-1細胞高效轉染試劑操作步驟
提前 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,再進行轉染。
核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細胞培養基中加入核酸復合物:根據參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻;細胞培養基 里面可以含有血清。
細胞換液:轉染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液。
分析結果:質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩定表達細胞株的篩選,則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。
三、產品說明:
1、產品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規格
貨號:AD600075
規格:0.75ml
3、儲存條件
常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復凍融。
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