in vivo Advanced轉染試劑
描述
in vivo Advanced轉染試劑可以通過靜脈注射或體內局部組織注射的方式完成轉染過程。此外,轉染過程中總注射體積較小,致密組織可通過顯微注射來完成轉染,且轉染復合物在體內循環時間較長。DNA,siRNA及共轉染均可用此款轉染試劑來完成轉染操作。
基本條件
DNA
濃度: 300 ng/ul - 2 μg/ul;
溶劑: 質粒DNA需溶于雙蒸水或超純水;
內毒素: 去內毒素
RNA
濃度: 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM
活體動物體內轉染操作步驟
轉染復合物制備: 核酸和轉染試劑直接按照1:1混合。之后用移液器吹打混合溶液10-15次以充分混勻。將混合溶液于室溫環境中靜置10-15分鐘,轉染復合物即可制備結束。在復合物制備過程中,離心管的管壁要確保沒有液體殘留。
用注射器或顯微注射針完成靜脈注射或局部組織注射操作。
注射后3-5天,轉染效率可達到峰值,靶基因的表達量可于此時進行檢測。
活體動物體內轉染注射用量
動物 | 注射方式 | 最大注射量(ul) | DNA用量(ug) | siRNA用量(ul) | 轉染試劑用量(ul) |
新生小鼠 | 腦室內注射 | 2 | 1 | 1 | 1 |
裸鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腫瘤內注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年小鼠 | 尾靜脈注射 | 400 | 62 | 62 | 62 |
腹腔內注射 | 800 | 100 | 100 | 100 | |
腦室內注射 | 5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 | |
腫瘤內注射 | 50 | 17 | 17 | 17 | |
成年大鼠 | 尾靜脈注射 | 2000 | 505 | 505 | 505 |
腦室內注射 | 25 | 15 | 15 | 15 |
注意事項
DNA (μg) 或20 μM siRNA (μl)與轉染試劑的比例為1:1。
上表中siRNA的注射體積是針對20 μM siRNA的。如果siRNA的濃度為40 μM,則注射體積需減半;如果siRNA的濃度為80 μM,則注射體積需為表中體積的1/4;以此類推。
進行局部組織注射實驗時,轉染復合物的用量為5-10 μl/cm2。
進行共轉染實驗時,核酸總用量應和上表中用量一致,各種核酸用量的比例應根據實驗目的進行調整。之后將各種核酸與轉染試劑進行充分混合。
在具體實驗操作過程中,核酸和轉染試劑的用量可根據上表中最大注射用量進行適當調整。
訂貨信息
品名 | 貨號 | 規格 |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500025 | 0.25 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500050 | 0.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500075 | 0.75 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500150 | 1.50 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV500500 | 5.00 ml |
in vivo Advanced Transfection Reagent | AV501000 | 10.00 ml |
深圳市安培生物科技有限公司是美國ZETA LIFE公司中國代理商。ZETA LIFE轉染試劑大量現貨,均經過反復充分驗證,轉染效果好且重復性佳,提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。